
【产品概述】
本试剂盒为全新一代逆转录试剂盒,在一管内融合了基因去除与 RNA 逆转录过程中所有需要的组分,只需要加入 RNA 模板和水即可逆转录反应。与普通逆转录酶系统相比,具有逆转录能力强(合成较多全长 cDNA)、无 RNase H 活性、热稳定性高和半衰期长等优点。本制品含有去基因组成分新型 dsDNase,能够特异性去除双链 DNA,而不消化 RNA 样品、逆转录引物及合成的 cDNA,并且具有热敏感性,可在 55℃快速地不可逆失活,快速实现去除基因组与逆转录反应。合成的第一链 cDNA能直接用于 PCR 或荧光定量 PCR 的模板,第二链 cDNA 的合成或线性 RNA 扩增,也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链 cDNA 的实验。
【产品特点】
1、一管式逆转录试剂,操作简便;
2、热稳定性高,反应温度 42-55℃,有助于 RNA 二级结构打开,大幅提高热稳定性和 cDNA 合成效率;
3、无 RNase H 活性,可避免第一链 cDNA 合成过程中,RNA/DNA 杂交模板链中 RNA 降解,保证 cDNA 合成的质量;
4、含有去基因组成分,反转录时可同步去除基因组 DNA 污染,保证定量结果更加准确;
5、合成片段≤15 kb。
【产品组分】
| 组分货号 | 组分名称 | 组分规格 |
| LBQ7513-001 | 5×Cofitt®Plus One RT Reaction Mix*1 |
400 μl |
| LBQ7513-104 | RNase Free Water | 1 ml×2 |
*1: 包含Buffer、dNTPs、Random Hexamer Primer/Oligo (dT)20 Primer mix、Reverse Transcriptase、Ribonuclease Inhibitor和dsDNase等。
【注意事项】
1、请使用高质量的 RNA 模板进行试验,1~2 μg RNA 反转后大约能得到 0.7-1.5 μg cDNA,建议稀释 3 ~ 5 倍后使用。
2、使用之前请将试剂完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度不均影响实验结果。
3、以 RNA 为模板获得全长的第一链 cDNA,其起始位点由所用引物所决定:
a、随机引物(Random Primer)在 RNA 模板上没有特异性结合位点,所有 RNA 都可以做为第一链 cDNA 合成的模板;
b、Oligo dT Primer 只能以 poly(A) mRNA 作为 cDNA 合成的模板;
c、采用序列特异性引物(Gene Specific Primer)以其结合位点为起始位点。
4、合成的第一链 cDNA 产物可直接加入 PCR 反应混合物中进行扩增,但加入体积不应超过 PCR 反应总体系的 10%,否则可能影响目的片段的产量。
注:原货号LBQ7511产品的升级版本。








